Прогностическая роль экспрессии маркера PBRM1 при светлоклеточном раке почки

Введение. Светлоклеточный почечно-клеточный рак (скПКР) является наиболее частым гистологическим типом рака этой локализации. Выделяют 16 генов, нарушения которых играют значительную роль в канцерогенезе скПКР. Вторым по частоте генетических нарушений в скПКР после гена-супрессора VHL является ген PBRM1, который мутирует в 40—50 % случаев скПКР.

Цель исследования — анализ влияния нарушений экспрессии белка PBRM1 на выживаемость пациентов со скПКР.

Материалы и методы. В исследование были включены 137пациентов с впервые выявленным и гистологически верифицированным диагнозом скПКР. Для каждого участника исследования были собраны детальная медицинская информация и данные анкетирования. От всех больных до начала лечения были получены образцы крови и удаленной во время хирургической операции опухолевой ткани. Все пациенты ежегодно прослеживаются в целях получения актуальной информации об их жизненном статусе, динамике заболевания, лечении. Минимальное время прослеживания — 22мес, максимальное — 128мес, среднее — 61,8мес, медиана — 48мес. Иммуногистохимическое (ИГХ) исследование экспрессии PBRM1 было выполнено по стандартной методике c поликлональными кроличьими антителами PB1[N1N2] N-term (GeneTex 100781) в разведении 1:50, проявление проводилось с использованием DAB. Белковый продукт гена PBRM1 дикого типа в норме функционирует и выявляется в ядре. Отсутствие ядерной экспрессии PBRM1 указывает на генетические или эпигенетические нарушения.

Результаты. Специфическая для рака почки выживаемость статистически достоверно ниже у больных, в опухолевых клетках которых нет экспрессии белка PRBM1. Наилучшая 5- (84 %) и 10-летняя (84 %) выживаемость отмечена у больных с диф­фузной ядерной экспрессией белка PBRM1. Различия в выживаемости этих больных и тех, у которых нет экспрессии белка PBRM1, статистически высоко достоверны (р = 0,004). Нами впервые проведен анализ выживаемости больных скПКР с фо­кальной ядерной экспрессией PBRM1. У этих пациентов выживаемость ниже, чем у больных с диффузной экспрессией, но выше, чем у больных с отсутствием ядерной экспрессии PBRM1 (р = 0,02). Цитоплазматическая экспрессия PBRM1 на выживаемость не влияет.

Заключение. Таким образом, полученные нами результаты указывают на прогностическую значимость активности гена PBRM1, нарушение функции которого встречается почти в половине случаев скПКР. ИГХ-исследование является адекватным, надежным и доступным методом для определения экспрессии белка PBRM1 и, соответственно, может применяться на практике. Особен­но следует отметить благоприятное течение и прогноз болезни у пациентов с I—II стадиями скПКР, у которых сохранена ядер­ная экспрессия белка PBRM1: 5-летняя выживаемость у них составляет 100 %. Это наблюдение крайне важно для принятия решения по тактике лечения таких больных.

1. Siegel R.L., Miller K.D., Jemal A. Cancer Statistics. CA Cancer J. Clin 2016;66(1):7— 30. DOI: 10.3322/caac.21332. PMID: 26742998.

2. Scelo G., Larose T.L. Epidemiology and Risk Factors for Kidney Cancer. J Clin On¬col 2018;29:JCO2018791905. DOI: 10.1200/JCO.2018.79.1905. PMID: 30372394.

3. Злокачественные новообразования в России в 2017 году (заболеваемость и смертность). Под ред. А.Д. Каприна, В.В. Старинского, Г.В. Петровой. М.: МНИОИ им. ПА. Герцена - филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России, 2018. 250 с.

4. Заридзе Д.Г., Максимович Д.М. Профи¬лактика злокачественных новообразова¬ний. Успехи молекулярной онкологии 2017;4(2):8—25. DOI: 10.17650/2313-805X-2017-4-2-8-25.

5. Заридзе Д.Г., Мукерия А.Ф., Шаньги- на О.В., Матвеев В.Б. Молекулярная эпидемиология рака почки. Онкоурология 2018;14(3):107—19. DOI: 10.17650/1726-9776-2018-14-3-107-119.

6. Moch H., Cubilla A.L., Humphrey P.A. et al. The 2016 WHO classification of tu¬mours of the urinary system and male genital organs-part A: renal, penile, and testicular tumours. Eur Urol 2016;70(1):93—105. DOI: 10.1016/j.eururo.2016.02.029. PMID: 26935559.

7. Linehan W.M., Walther M.M., Zbar B. The genetic basis of cancer of the kidney. J Urol 2003;170(6 Pt 1):2163—72. DOI: 10.1097/01.ju.0000096060.92397.ed. PMID: 14634372.

8. Varela I., Tarpey P., Raine K. et al. Exome sequencing identifies frequent mutation of the SWI/SNF complex gene PBRM1 in renal carcinoma. Nature 2011;469(7331):539—42. DOI: 10.1038/nature09639 PMID: 21248752.

9. Scelo G., Riazalhosseni Y., Greger L. et al. Variation in genomic landscape of clear cell renal cell carcinoma across Europe. Nat Commun 2014;29(5):5135. DOI: 10.1038/ncomms6135. PMID: 25351205.

10. Liao L., Testa J.R., Yang Н. The roles of chromatin-remodelers and epigenetic modifiers in kidney cancer. Cancer Genet 2015;208(5):206—14. DOI: 10.1016/j.cancergen.2015.02.008. PMID: 25873528.

11. Nargund A.M., Pham C.G., Dong Y. et al. The SWI/SNF Protein PBRM1 restrains VHL-loss-driven clear cell renal cell carcinoma. Cell Rep 2017;18(12):2893—906. DOI: 10.1016/j.celrep.2017.02.074.PMID: 28329682.

12. Hakimi A.A., Chen Y.B., Wren J. et al. Clinical and pathologic impact of select chromatin-modulating tumor suppressors in clear cell renal cell carcinoma. Eur Urol 2013;63(5):848—54. DOI: 10.1016/j.eururo.2012.09.005. PMID: 23036577.

13. Sato Y., Yoshizato T., Shiraishi Y. et al. Integrated molecular analysis of clear-cell renal cell carcinoma. Nat Genet2013;45(8):860—7. DOI: 10.1038/ng.2699. PMID: 23797736.

14. Kapur P., Pena-Llopis S., Christie A. Effects on survival of BAP1 and PBRM1 mutations in sporadic clear-cell renal-cell carcinoma: a retrospective analysis with independent validation. Lancet Oncol 2013;14(2):159—67. DOI: 10.1016/S14702045(12)70584-3. PMID: 23333114.

15. Pawlowski R., Muhl S.M., Sulser T. et al. Loss of PBRM1 expression is associated with renal cell carcinoma progression. Int J Cancer 2013;132(2):E11—7. DOI: 10.1002/ijc.27822. PMID: 22949125.

16. da Costa W.H., Rezende M., Carneiro F.C. et al. Polybromo-1 (PBRM1), a SWI/SNF complex subunit is a prognostic marker in clear cell renal cell carcinoma. BJU Int 2014;113(5b):E157—63. DOI: 10.1111/bju.12426. PMID: 24053427.

17. Nam S.J., Lee C., Park J.H., Moon K.C. Decreased PBRM1 expression predicts unfavorable prognosis in patients with clear cell renal cell carcinoma. Urol Oncol 2015;33(8):340.e9—16. DOI: 10.1016/j.urolonc.2015.01.010. PMID: 26003625.

18. Piva F., Giulietti M., Occhipinti G. et al. Computational analysis of the mutations in BAP1, PBRM1 and SETD2 genes reveals the impaired molecular processes in renal cell carcinoma. Oncotarget 2015;6(31):32161—8. DOI: 10.18632/oncotarget.5147. PMID: 26452128.

19. Pena-Llopis S., Vega-Rubin-de-Celis S., Liao A. et al. BAP1 loss defines a new class of renal cell carcinoma. Nat Genet 2012;44(7):751 —9. DOI: 10.1038/ng.2323. PMID: 22683710.

20. Joseph R.W., Kapur P., Serie D.J. et al. Clear cell renal cell carcinoma subtypes identified by BAP1 and PBRM1 expression. J Urol 2016;195(1):180—7. DOI: 10.1016/j.juro.2015.07.113. PMID: 26300218.

21. Kaplan E.L., Meier P. Nonparametric estimation from incomplete observations. J Amer Stat Assoc 1958;53:457-81.

22. Stata Statistical Software. Release 14.0. College Station, TX: Stata Corporation.

23. Ho T.H., Kapur P., Joseph R.W. et al. Loss of PBRM1 and BAP1 expression is less common in non-clear cell renal cell carcinoma than in clear cell renal cell carcinoma. Urol Oncol 2015;33(1):23.e9-14. DOI: 10.1016/j.urolonc.2014.10.014. PMID: 25465300.

24. Eckel-Passow J.E., Serie D.J., Cheville J.C. et al. BAP1 and PBRM1 in metastatic clear cell renal cell carcinoma: tumor heterogeneity and concordance with paired primary tumor. BMC Urol 2017;17(1):19. DOI: 1186/s12894-017-0209-310. PMID: 28327121.

25. Casuscelli J., Vano Y., Fridman W.H., Hsieh J.J. Molecular classification of renal cell carcinoma and its implication in future clinical practice. Kidney Cancer 2017;1(1):3—13. DOI: 10.3233/KCA-170008. PMID: 30334000.

26. Gerlinger M., Horswell S., Larkin J. et al. Genomic architecture and evolution of clear cell renal cell carcinomas defined by multiregion sequencing. Nat Genet 2014;46(3):225—33. DOI: 10.1038/ng.2891.PMID: 24487277.

27. Sankin A., Hakimi A.A., Mikkilineni N. et al. The impact of genetic heterogeneity on biomarker development in kidney cancer assessed by multiregional sampling. Cancer Med 2014;3(6):1485—92. DOI: 10.1002/cam4.293. PMID: 25124064.

28. Jiang W., Dulaimi E., Devarajan K. et al. Intratumoral heterogeneity analysis reveals hidden associations between protein expression losses and patient survival in clear cell renal cell carcinoma. Oncotarget 2017;8(23):37423—34. PMID: 28445125.