Поиск новых микроРНК для дифференциальной диагностики тератом

Введение. На сегодняшний день отсутствуют точные модели для прогнозирования морфологического строения герминогенных опухолей яичек (ГОЯ) до оперативного лечения. По данным литературы, в качестве нового диагностического маркера ГОЯ, а также для дифференциальной диагностики основных гистологических форм после проведенной химиотерапии возможно использование микроРНК.

Цель исследования – поиск новых микроРНК как маркеров для дифференциальной диагностики тератомы и живой опухолевой ткани.

Материалы и методы. В исследовании были проанализированы свежезамороженные образцы тканей, полученные после орхифуникулэктомии (n = 46) и забрюшинной лимфаденэктомии (n = 42) у пациентов с диагнозом ГОЯ. Из образцов тканей выделяли микроРНК, которые анализировали с помощью полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией.

Результаты. В результате изучения материалов Атласа ракового генома выбраны микроРНК-196a-5p и микроРНК-200b-3p с дифференциальной экспрессией в образцах опухолевой ткани различных гистотипов ГОЯ. Данные микроРНК достоверно гиперэкспрессируются в несеминомах, при этом уровни их экспрессии в этих ГОЯ значимо различаются с таковыми как в нормальных тканях, так и в семиномах. Уровень экспрессии микроРНК-196b-5p в тератомах, образцы которых получены после забрюшинной лимфаденэктомии, достоверно выше, чем в семиномах, а уровень экспрессии микроРНК-200b-3p достоверно выше, чем в ткани с некротическими изменениями после терапии. ROC-анализ показал чувствительность 89 % и специфичность 79 % при использовании в качестве диагностического маркера микроРНК-196b-5p. Для микроРНК-200b-3p чувствительность и специфичность составили 75 и 89 % соответственно.

Заключение. В данном исследовании мы впервые продемонстрировали, что микроРНК-196a-5p и микроРНК-200b-3p обладают высоким диагностическим потенциалом в качестве маркеров для выявления различных гистотипов ГОЯ, включая тератому.

1. Albers P., Albrecht W., Algaba F. et al. Guidelines on testicular cancer: 2015 update. Eur Urol 2015;68(6):1054–68. DOI: 10.1016/j.eururo.2015.07.044

2. Kollmannsberger C., Daneshmand S., So A. et al. Management of disseminated nonseminomatous germ cell tumors with risk-based chemotherapy followed by response-guided postchemotherapy surgery. J Clin Oncol 2010;28:537–42. DOI: 10.1200/JCO.2009.23.0755

3. Матвеев В.Б., Волкова М.И., Фигурин К.М. и др. Забрюшинная лимфаденэктомия после индукционной химиотерапии при диссеминированных несеминомных герминогенных опухолях яичка. Онкоурология 2010;6(1):54–8. DOI: 10.17650/1726-9776-2010-6-1-52-58

4. Leão R., van Agthoven T., Figueiredo A. et al. Serum miRNA predicts viable disease after chemotherapy in patients with testicular non-seminoma germ cell tumor. J Urol 2018;200(1):126–35. DOI: 10.1016/j.juro.2018.02.068

5. Christiansen A., Lobo J., Fankhauser C.D. et al. Integrated expression of circulating miR375 and miR371 to identify teratoma and active germ cell malignancy components in malignant germ cell tumors. Eur Urol 2021;1:35–6. DOI: 10.1016/j.eururo.2021.03.032

6. Sequeira J.P., Lobo J., Constâncio V. et al. DigiMir Test: establishing a novel pipeline for MiR-371a quantification using droplet digital PCR in liquid biopsies from testicular germ cell tumor patients. Front Oncol 2022;12:876732. DOI: 10.3389/fonc.2022.876732

7. Shen H., Shih J., Hollern D.P. et al. Integrated molecular characterization of testicular germ cell tumors. Cell Rep 2018;23(11):3392–406. DOI: 10.1016/j.celrep.2018.05.039

8. Lafin J.T., Kenigsberg A.P., Meng X. et al. Serum small RNA sequencing and miR-375 assay do not identify the presence of pure teratoma at postchemotherapy retroperitoneal lymph node dissection. Eur Urol Open Sci 2021;26:83–7. DOI: 10.1016/j.euros.2021.02.003

9. Moore J.A., Lehner M.J., Anfossi S. et al. Predictive capacity of a miRNA panel in identifying teratoma in post-chemotherapy consolidation surgeries. BJU Int 2023;4(1):81–7. DOI: 10.1002/bco2.143

10. Chen C., Ridzon D.A., Broomer A.J. et al. Real-time quantification of microRNAs by stem-loop RT-PCR. Nucleic Acids Res 2005;33(20):e179. DOI: 10.1093/nar/gni178

11. Schmittgen T., Livak K. Analyzing real-time PCR data by the comparative C(T) method. Nat Protoc 2008;3(6):1101–8. DOI: 10.1038/nprot.2008.73

12. Belge G., Grobelny F., Matthies C. et al. Serum level of microRNA-375-3p is not a reliable biomarker of teratoma. In Vivo 2020;34(1):163–8. DOI: 10.21873/invivo.11757

13. Yodkhunnatham N., Pandit K., Puri D. et al. MicroRNAs in testicular germ cell tumors: the teratoma challenge. Int J Mol Sci 2024;25(4):2156. DOI: 10.3390/ijms25042156