Background. Clear-cell renal-cell carcinoma (CCRCC) is the most common histological type of cancer of this localization. Changes in 16 genes were identified as significant in carcinogenesis of CCRCC. After VHL suppressor gene, PBRM1 gene is the second by frequency of genetic abnormalities in CCRCC and it is mutated in 40—50 % cases of CCRCC.
The study objectiveis to analyze the effect of abnormalities in PBRM1 protein expression on survival of patients with CCRCC.
Materials and methods. The study included 137patients with newly diagnosed and histologically confirmed CCRCC. For all study participant, detailed medical history and questionnaire data were acquired. Prior to treatment, blood samples and tumor tissue removed during surgery were obtainedfrom all patients. All patients are annually followed up for current information on their life status, disease dynamics, treatment. Minimalfollow-up time is 22 months, maximal is 128 months, mean is 61.8 months, median is 48 months. Immunohistochemical (IHC) testing of PBRM1 expression was performed using standard technique with polyclonal rabbit antibodies PB1[N1N2] N-term (GeneTex 100781) with 1:50 dilution, DAB staining. Normally, protein product of the wild type PBRM1 gene is functioning and can be detected in the nucleus. Absence of nuclear expression of PBRM1 points to genetic or epigenetic abnormalities.
Results.Renal cancer-specific survival is significantly lower in patients without expression of the PRBM1 protein in tumor cells. The longest 5- (84 %) and 10-year (84 %) survival was observed in patients with diffuse nuclear expression of the PBRM1 protein. Difference in survival of these patients compared to patients without PRBM1 protein expression is statistically significant (p = 0.004). We have performed an analysis of the association between survival of patients with CCRCC andfocal nuclear PBRM1 expression. In these patients, survival is lower than in patients with diffuse expression but higher than in patients without nuclear expression of PBRM1 (p = 0.02). Cytoplasmic expression of PBRM1 doesn’t affect survival.
Conclusion.The obtained results point to prognostic value of PBRM1 gene activity which is abnormal in almost half of all CCRCC cases. IHC testing is an appropriate, reliable and affordable method for determination of PBRM1 protein expression and therefore can be used in practice. Favorable course and prognosis in patients with stage I—II CCRCC and preserved nuclear expression of the PBRM1 protein should be noted: 5-year survival for these patients is 100 %. This observation is crucial for making decisions on treatment of these patients.
Введение. Светлоклеточный почечно-клеточный рак (скПКР) является наиболее частым гистологическим типом рака этой локализации. Выделяют 16 генов, нарушения которых играют значительную роль в канцерогенезе скПКР. Вторым по частоте генетических нарушений в скПКР после гена-супрессора VHL является ген PBRM1, который мутирует в 40—50 % случаев скПКР.
Цель исследования — анализ влияния нарушений экспрессии белка PBRM1 на выживаемость пациентов со скПКР.
Материалы и методы. В исследование были включены 137пациентов с впервые выявленным и гистологически верифицированным диагнозом скПКР. Для каждого участника исследования были собраны детальная медицинская информация и данные анкетирования. От всех больных до начала лечения были получены образцы крови и удаленной во время хирургической операции опухолевой ткани. Все пациенты ежегодно прослеживаются в целях получения актуальной информации об их жизненном статусе, динамике заболевания, лечении. Минимальное время прослеживания — 22мес, максимальное — 128мес, среднее — 61,8мес, медиана — 48мес. Иммуногистохимическое (ИГХ) исследование экспрессии PBRM1 было выполнено по стандартной методике c поликлональными кроличьими антителами PB1[N1N2] N-term (GeneTex 100781) в разведении 1:50, проявление проводилось с использованием DAB. Белковый продукт гена PBRM1 дикого типа в норме функционирует и выявляется в ядре. Отсутствие ядерной экспрессии PBRM1 указывает на генетические или эпигенетические нарушения.
Результаты. Специфическая для рака почки выживаемость статистически достоверно ниже у больных, в опухолевых клетках которых нет экспрессии белка PRBM1. Наилучшая 5- (84 %) и 10-летняя (84 %) выживаемость отмечена у больных с диффузной ядерной экспрессией белка PBRM1. Различия в выживаемости этих больных и тех, у которых нет экспрессии белка PBRM1, статистически высоко достоверны (р = 0,004). Нами впервые проведен анализ выживаемости больных скПКР с фокальной ядерной экспрессией PBRM1. У этих пациентов выживаемость ниже, чем у больных с диффузной экспрессией, но выше, чем у больных с отсутствием ядерной экспрессии PBRM1 (р = 0,02). Цитоплазматическая экспрессия PBRM1 на выживаемость не влияет.
Заключение. Таким образом, полученные нами результаты указывают на прогностическую значимость активности гена PBRM1, нарушение функции которого встречается почти в половине случаев скПКР. ИГХ-исследование является адекватным, надежным и доступным методом для определения экспрессии белка PBRM1 и, соответственно, может применяться на практике. Особенно следует отметить благоприятное течение и прогноз болезни у пациентов с I—II стадиями скПКР, у которых сохранена ядерная экспрессия белка PBRM1: 5-летняя выживаемость у них составляет 100 %. Это наблюдение крайне важно для принятия решения по тактике лечения таких больных.